為什么要細(xì)胞計數(shù)？

　　在細(xì)胞培養(yǎng)工作中，常需要了解細(xì)胞生活狀態(tài)和鑒別細(xì)胞死活，確定細(xì)胞接種濃度和數(shù)量以及了解細(xì)胞存活率和增殖度，如用酶消化制備的細(xì)胞懸液中細(xì)胞活力的鑒別，凍存細(xì)胞復(fù)蘇后的活力檢測等。細(xì)胞懸液制備后，常用活體染料臺盼藍(lán)對細(xì)胞進(jìn)行染色，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。準(zhǔn)確的細(xì)胞計數(shù)對評估培養(yǎng)的細(xì)胞生長是至關(guān)重要，因為錯誤的計數(shù)會導(dǎo)致關(guān)于細(xì)胞健康的錯誤結(jié)論。細(xì)胞計數(shù)可以使用血球計數(shù)板、自動計數(shù)器進(jìn)行。細(xì)胞計數(shù)一般用血細(xì)胞計數(shù)板，按白細(xì)胞計數(shù)方法進(jìn)行計數(shù)，便于確定細(xì)胞的生活狀況。
 
　　細(xì)胞生長的每個階段：
 
　　停滯期：細(xì)胞適應(yīng)培養(yǎng)條件的階段，細(xì)胞在此階段不分裂。細(xì)胞通常在起始培養(yǎng)后的24小時內(nèi)附著，該階段的總時長取決于培養(yǎng)之初使用細(xì)胞的生長階段和接種密度。
 
　　對數(shù)期：細(xì)胞在此階段積極分裂，是評估群體生長和通用數(shù)據(jù)收集的時間。對數(shù)期的后期，過度擁擠導(dǎo)致細(xì)胞脅迫之前是傳代細(xì)胞(亞培養(yǎng))的時機(jī)。
 
　　平穩(wěn)期：隨著細(xì)胞達(dá)到100%融合，細(xì)胞在此階段生長放緩，不足1/10的細(xì)胞處于活躍細(xì)胞周期。細(xì)胞在此階段容易受傷，因此需要小心觀察以確保細(xì)胞在此階段之前或之初進(jìn)行傳代。
 
　　衰退期：細(xì)胞周期的自然組成部分。在此階段，隨著細(xì)胞死亡占據(jù)主導(dǎo)地位，活細(xì)胞群體數(shù)量減少。
 
　　細(xì)胞計數(shù)原理：細(xì)胞懸液制備后，需要計算懸液中所含細(xì)胞數(shù)量；一般以細(xì)胞數(shù)/毫升表示。因只有健康的細(xì)胞才有活力，接種后能夠生長增殖，所以在接種應(yīng)先檢查一下細(xì)胞的活力。